-
A في عملية تكوين النظام ، تكون المكونات مثل البادئات والإنزيمات زائدة ، لكن القوالب ليست زائدة.تدخل جزيئات DNA النموذجية بشكل عشوائي كل نظام تفاعل صغير.بعد تضخيم PCR ، يكمل النظام الذي يحتوي على القالب التضخيم ، ولا يحتوي النظام على القالب بدون تضخيم.
-
A السبب: تم تحور السلالة ، والمسبار الحالي غير مناسب للكشف ؛لا يمكن اكتشاف الحمض النووي الناتج عن طريقة الاستخراج (الفشل في الاستخراج الكامل للبكتيريا والفطريات وما إلى ذلك المدرجة في العينة) ؛
التحقق من الاستبعاد: يمكن التحقق من استخلاص الحمض النووي من المزرعة ، متبوعًا بالتضخيم باستخدام تحقيقاتنا ؛من المستحسن أن تكون عينة الدم واختبار الحمض النووي من نفس عينة الدم.
-
A معيار الحكم ≥ 3 قطرات إيجابية ، ولكن بالنسبة للقطرات الإيجابية عند النقطة الحرجة ، من الضروري إجراء تحليل متعمق بالاقتران مع مواد مراقبة الجودة السلبية / الإيجابية.عندما يكون هناك خط عمودي للإشارات ، يتم الحكم عليه على أنه إشارة غير إيجابية.
عينات منخفضة التركيز ، يمكن اختيار مخزن مؤقت متعدد أعلى لتعديل تحميل العينة.
-
A البلازما: يوصى بـ ≥ 2 مل ، المكونات بسيطة نسبيًا ، ويتم إزالة تلوث الحمض النووي البشري.تركيبة الحمض النووي أبسط ، وتركيز الحمض النووي البكتيري أعلى ، وهو مناسب للكشف.
ملحوظة: يجب ألا تكون سرعة الدوران عالية جدًا أثناء الطرد المركزي ، وإلا فإنها ستؤدي بسهولة إلى فقدان البكتيريا داخل الخلايا وتؤثر على نتيجة الاختبار النهائية ؛
الدم الكامل: يوصى بـ ≥4 مل ، المكونات كاملة نسبيًا ، والاتساق مع عينات مزرعة الدم جيد ، لكن هناك تلوث بالحمض النووي البشري.
-
A البكتيريا (البكتيريا موجبة الجرام ، البكتيريا سالبة الجرام) ، الفطريات الغازية ، الفيروسات.في الوقت نفسه ، يمكن أيضًا إجراء الكشف عن الجينات المقاومة للأدوية.
-
A يوصى بإعداد تجربة تحكم للقسمة.عند عدم التعيين ، استخدم بشكل عام شدة التألق البالغة 3000 كنقطة بداية ، أو استخدم المجموعة السلبية كمرجع للحكم على الموجب.يمكنك الرجوع إلى تجربة قياس التدفق الخلوي لعمل تقسيم.
-
A يعتمد التقدير الكمي للفلورة على منحنى التضخيم.سيتم حساب إشارة الكشف لكل دورة بواسطة لوغاريتم 2 إلى N ، والذي يمكن استخدامه فقط لتمييز الفرق بأكثر من مرتين.يمكن لنظام PCR الرقمي اكتشاف اختلافات التعبير الجيني منخفضة تصل إلى 0.1 مرة بواسطة صيغة حساب توزيع Poisson.
-
A بالنسبة لتكرار الطفرات ، يمكن أن يصل تفاعل البوليميراز المتسلسل الرقمي إلى 0.01٪ أو أقل ، ويمكن تحقيق نسخة واحدة للكائنات الحية الدقيقة ؛يمكن أن يحقق RT-PCR 1٪ فقط.
