مقدمة الأدب |تقنية Rainsure Digital PCR و Multitype Typing and Treatment Plasmodium - المراقبة الكمية

_{العنوان: اختبار سريع متعدد الإرسال لطفيليات الملاريا البشرية بواسطة تفاعل البوليميراز المتسلسل الرقمي}

_{DOI: 10.1016 / j.cca.2022.12.001}

_{مجلة: Clinica Chimica Acta}

_{الوحدة: مستشفى هواشان التابع لجامعة فودان}

_{تاريخ النشر: ديسمبر 2022}

_{منصة البحث: نظام Rainsure Scientific DropDx-2044 الرقمي PCR}

_{في ديسمبر 2022 ، نشر فريق مينج جوان وهاوكين جيانغ من مستشفى هواشان التابع لجامعة فودان مقالة 'اختبار سريع متعدد الإرسال لطفيليات الملاريا البشرية بواسطة PCR الرقمي ' في مجلة 'Clinica Chimica Acta '.}

_{أسست هذه الدراسة نظام PCR رقمي متعدد الإرسال يركز على الاكتشاف الجزيئي السريع لعدوى الملاريا منخفضة التركيز.وهي مناسبة لتشخيص عدوى الملاريا المختلطة والرصد المستمر لعينات متعددة ، وكوسيلة مهمة للكشف السريري عن التقدير الكمي المطلق لمسببات الأمراض ، لضمان التشخيص السريع والدقيق للمرضى المشتبه في إصابتهم بالملاريا.الحساسية التحليلية للـ PCR متعدد الإرسال منخفضة مثل 0.557 نسخة / ميكرولتر ، والحساسية 98.0٪ ، والخصوصية 100٪ ، وهي مناسبة بشكل خاص لتشخيص عدوى الملاريا منخفضة التركيز ومراقبة التأثير العلاجي أثناء العلاج. .}

_{خلفية البحث}

_{تعتبر الملاريا والإيدز والسل في جميع أنحاء العالم واحدة من المشكلات العامة الرئيسية الثلاث التي تهدد حياة الإنسان وصحته.وهي مرض طفيلي يسببه المتصورة وينتقل عن طريق بعوض الأنوفيلة.وفقًا لأحدث تقرير عن الملاريا في العالم لمنظمة الصحة العالمية ، هناك ما يقرب من 241 مليون حالة ملاريا في جميع أنحاء العالم و 627000 حالة وفاة بسبب الملاريا.مقارنة بالعام السابق ، كان هناك حوالي 14 مليون حالة جديدة و 69000 حالة وفاة جديدة.}

_{المتصورة هي بوغ تنتقل عن طريق بعوضة الأنوفيلة وهي العامل المسبب للملاريا.أربعة أنواع رئيسية من المتصورة التي تطفل جسم الإنسان ، بما في ذلك المتصورة النشيطة والمتصورة الملاريا والمتصورة المنجلية والمتصورة البيضوية.طفيليات الملاريا هذه لها مضيفان ، بعوض الأنوفيلة والبشر.تتطفل في خلايا الكبد وخلايا الدم الحمراء على التوالي عند البشر.في كريات الدم الحمراء ، بالإضافة إلى تكاثر الفصام ، تشكل بعض الميروزويت نباتات مشيمية وتبدأ في التطور الأولي للتكاثر الجنسي.}

_{في عام 2021 ، مع عدم وجود حالات ملاريا أصلية في غضون أربع سنوات ، تم الاعتراف بالصين بنجاح من قبل منظمة الصحة العالمية (WHO) كدولة خالية من الملاريا.في الوقت الحاضر ، حالات الإصابة بالملاريا مستوردة بشكل رئيسي من الخارج.}

_{طرق البحث}

_{تم اختيار ما مجموعه 39 مريضًا مصابًا بالملاريا تم تشخيصهم عن طريق الفحص المجهري من مستشفى هواشان من عام 2016 إلى عام 2021 ؛تم جمع 70 عينة دم من هؤلاء المرضى.بالإضافة إلى ذلك ، تم تضمين 20 شخصًا سليمًا و 20 مريضًا بالحمى و 6 مرضى بأنواع أخرى من الطفيليات المصابة بالدم في هذه الدراسة.تم اختبار كل عينة دم بالتوازي عن طريق مسحة الدم و dPCR.من خلال تحسين نظام الكشف عن المسبار ذي العلامات الفلورية الرباعي أحادي النظام ، تم التحقق من القدرة الكمية الدقيقة لـ dPCR ، وتم إخراج رقم النسخ الدقيق لكل وحدة حجم لعينات دم الملاريا السريرية.كما تم استخدام اختبار تشخيصي سريع للتحقق من صحة النتائج التي تم الحصول عليها بواسطة dPCR.}

_{نتائج البحث}

_{يتيح نظام dPCR التشخيص السريع والقياس الكمي لعينات الملاريا DNA.كانت الحساسية التحليلية لـ dPCR المتعدد منخفضة تصل إلى 0.557 نسخة / ميكرولتر (95٪ CI 0.521-0.607) ، وكانت حساسيتها لتشخيص العينات السريرية 98.0٪ ، وكانت خصوصيتها 100٪.بالإضافة إلى ذلك ، تم الكشف عن ثلاث عينات متعددة للعدوى المشتركة لـ Plasmodium بواسطة نظام dPCR ، بما في ذلك حالة واحدة من عدوى Plasmodium ثلاثية.من خلال الاختبار المستمر لعينات الدم اليومية من 39 مريضًا في الدراسة ، يمكن لـ dPCR مراقبة فعالية العلاجات الدوائية.أظهرت النتائج أن نطاق تركيز DNA Plasmodium falciparum بعد العلاج هو 0 نسخة / ميكرولتر -5474 نسخة / ميكرولتر ، مما يحقق المراقبة في الوقت الفعلي للتأثير العلاجي للأدوية المضادة للملاريا.ووجدت الدراسة أيضًا أن اكتشاف البلازموديوم كان أكثر سهولة وإيجابية باستخدام عينات خلايا الدم المستنفدة للبلازما مقارنة بالدم الكامل.}

_{يمكن لنظام تفاعل البوليميراز المتسلسل الرقمي متعدد الإرسال الكشف بوضوح عن نوعين أو ثلاثة أنواع من عدوى الملاريا المختلطة لعينات دم كاملة ، لتشخيص عدوى الملاريا المختلطة المتعددة بشكل فعال.هذا مكمل مثالي لطريقة الفحص المجهري التقليدية لمسحة الدم ، والتي يمكن أن تعوض في الوقت المناسب عن الكشف المفقود عن الملاريا غير النمطية في مسحات الدم ومرضى العدوى المختلطة منخفضة التركيز ، وبالتالي مساعدة الأطباء على تعديل نظم الأدوية في الوقت المناسب.}

_{أظهرت المراقبة المستمرة للمريض لمدة تصل إلى 20 يومًا أن تفاعل البوليميراز المتسلسل الرقمي يمكن أن يحدد بدقة تركيز الملاريا في الدم الكامل للمريض ، ويظهر بصريًا حالة العدوى الحقيقية للمريض ، ويعكس التغير في معدل الإصابة بالملاريا لدى المريض في الوقت المناسب تحقيق الغرض من المراقبة في الوقت الحقيقي لفعالية الأدوية المضادة للملاريا ، هو تقديم أدلة معملية أكثر موثوقية للقضاء على الملاريا لدى المرضى.}